Diabetologia：激活但功能受损的记忆Tregs在1型糖尿病病患者进展缓慢的过程中逐渐扩展

从第一次消失呼吸道自身突变到消失1同型癌症医学呕吐的重大突破百余人在幼儿后期就有很好的叙述，多个呼吸道自身突变HIV的幼儿里有70%在血清转换后10短期内罹患癌症，而随访15年的幼儿这一数量减低到84%。比起之下，占医学1同型癌症一半以上的同型1同型癌症的发病机制还没有取得充分的统计分析。

越来越多的人开始可用分期系统会来定义1同型癌症的重大突破：有机棒状在消失多种呼吸道自身突变时进入第1阶段，消失血糖间歇性时进入第2阶段，消失呕吐时进入第3阶段。一些多发呼吸道自身突变HIV的有机棒状，在1期和2期，重大突破很慢速，并发展为发病的1同型癌症。我们之后叙述了一小组在首次样品到多种呼吸道自身突变比对后至极少10年无癌症的极慢速重大突破者，这小组病人人数极少，但特点十分明确。随后，我们发现呼吸道自身特异性特异性CD8+T细胞会催化将在重大突破减慢速的病人里大棒状上不存在，但在近期发病和一直存在的癌症病人里很容易样品到。这可能确实，与重大突破病人比起，这些病人免疫性催化将的适度加强。

早期统计分析确实，尽管适度性T细胞会(Treg)总数正常，但癌症病人存在一些新功能原因，其里包括对IL-2的催化将能力也减小。此外，癌症病人里的畸变CD4+T细胞会可能对适度更具抵抗性，表现为畸变T细胞会的抑止减慢，自然产生的Treg和棒状内产生的诱导Treg，以及特异性经历的CD4+T细胞会里IL-2催化将减慢。本统计分析的意在是叙述了CD4+适度性T细胞会(Treg)在一小群极减慢速重大突破者里的特点，他们的平均比率为43岁(31-72岁)，随访一段时间为18-32年。

方法：BOX统计分析是一项以一些人为基础的纵向统计分析，在21岁下述确诊的病人亲属里安全检查1同型癌症的危险因素。我们之后叙述了一直减慢速重大突破者的特点，他们保持良好多重呼吸道自身突变HIV最多10年，但没有消失癌症的医学呕吐，慢速性或非展开性免疫性。随后，10名此后保持良好无癌症并愿意共享大量血液循环比对的减慢速重大突破者划定T和B细胞会新功能分析。在目前的统计分析里，8名慢速重大突破者(SP小组)，里位比率43岁(31-72岁)，18 - 32岁相互间的呼吸道自身突变HIV。所有的自发性都位处1同型癌症重大突破的1期，尽管一些人随后失去了呼吸道自身突变对某些特异性的HIV催化将，然而，一名病人仍未位处2期至极少6年，但没有消失医学呕吐，一名病人被诊断为癌症，该人脑72岁，在捕获科学统计分析比对时，其HbA1c增高到53 mmol/mol(7%)，在统计分析里对该酪氨酸展开了单独检验。分离外周血单个核细胞会(PBMCs)，引入多参数流式细胞会绝技和T细胞会抑止试验检验酪氨酸里Treg的频百余人、表同型和新功能。可用FlowSOM和CITRUS(聚类鉴定、表征和回归)展开无督导聚类分析，检验Treg表同型。

结果：与心理健康酪氨酸比起，来自慢速重大突破棒状的梦境CD4+T细胞会的督导聚类标示出，触发的梦境CD4+ Treg频百余人减低，与糖皮质激素诱导的TNFR相关蛋白(GITR)暗示减低有关。一名HbA1c增高的病人与重大突破减慢速者和也就是说的结果确实比起，Treg谱有所相异。新功能最近，与心理健康酪氨酸比起，来自减慢速重大突破棒状的Treg依赖性的CD4+畸变T细胞会抑止明显受损。表现为对畸变CD4+T细胞会CD25和CD134暗示的抑止减低。

由此可知1 深入的表同型分析标示出，CD4+Treg流感病毒在慢速重大突破缓冲区里减低。由FlowSOM聚合的Treg楼内，聚集在来自所有酪氨酸的活CD4+CD45RA -细胞会上。根据标示不止物暗示鉴定不止10个元簇:梦境T细胞会_1;梦境T cell_2;梦境T cell_3;梦境T cell_4;CD49b梦境T细胞会;HLA-DR + GITR +梦境T细胞会;闪存Treg_1;闪存Treg_2;闪存Treg_3;和闪存Treg_4。(a)可用9个相异Treg标示不止聚合的10个元簇的MST。每个路由器代表一个坦克部队(100个坦克部队)，很大的元坦克部队(10个元坦克部队)在路由器小组周遭上色。每个路由器里的饼由此可知指不止单个标示不止的暗示层级。(b)每个元聚类的热由此可知，以标示出整棒状标示不止暗示。(c, d)为HD小组(c)和SP小组(d)聚合由此可知，以及FlowSOM识别的每个元簇的裂口。(e-l)相对于总数级为每个metacluster箱中央线由此可知(总数级> 0.05%)确切为HD和SP小组:闪存Treg_2 (e),闪存Treg_3 (f),闪存Treg_4 (g), HLA-DR + GITR +梦境T细胞会(h)、梦境T cell_1(i),梦境T cell_2 (j),梦境T cell_3 (k) n d CD49b梦境T细胞会(l)。紫色带子代表**SP 606。**p< 0.01, Wilcoxon配对小写字母秩化验。此键适用于由此可知形部分(a)， (c)， (d)和d (e-l)

由此可知2 可用CITRUS的预测模同型属实，Treg频百余人的减低是重大突破减慢速的标志。基准暂时性(a - f)和玉米分析(g-k)比较SP自发性和也就是说的HD自发性在CD4+CD45RA−T细胞会上的差异。(a)亲本CD25+ cd127 lotreg和CD25loCD127+T c e l群棒状的代表性由此可知。CD25+ cd127lotreg被CD39和FOXP3富集，然后通过HLA-DR和GITR暗示展开分离，虚拟FlowSOM群棒状。(b) HD(黑点)和SP(蓝点)小组以及酪氨酸SP 606(紫色)里CD25+ cd127的频百余人核心内容由此可知。(c-f) CD25+CD127loCD39+FOXP3+和CD25loCD127+暂时性邻域的箱中央线由此可知;(c) HLA-DRloGITR−(闪存Treg_2)， (d) HLA-DRintGITRlo(闪存Treg_3)， (e) HLA- d RhiGITR+(闪存Treg_4)， (f) HLA- d RhiGITR+(HLA-DR+GITR+闪存T cell)。(g - i)柑桔簇螺旋由(g) CD127， (h) CD25和(i) FOXP3暗示风速着色，交叉引人注意在簇被识别为SP和HD缓冲区相互间的相异。(j)箱中央线由此可知标示出了在SP(蓝点)和HD(灰点)小组里，CITRUS梦境Treg_3和Treg_4的相对于总数级(数量)。(k)直方由此可知标示出每个簇的表同型(紫色)和Treg标示不止相对于暗示与剧中暗示(紫色);上列，闪存Treg_3;后面一行，闪存Treg_4。剧中与所有其他簇里标示不止的暗示有关。*p< 0.05， **p< 0.01, Wilcoxon配对小写字母秩化验

由此可知3 与心理健康献血者比起，重大突破减慢速者梦境treg的GITR减低。每个梦境CD4+T细胞会元簇(梦境T细胞会_1;梦境T cell_2;梦境T cell_3;CD49b +梦境T细胞会;HLA-DR + GITR +梦境T细胞会;闪存Treg_2;闪存Treg_3;来自FlowSOM的memory Treg_4)样品每个暗示标示不止的变化。(a,b)来自HD (a)和S (b)缓冲区的暗示热由此可知(sp606不包括在内)。(c,d)梦境Treg_4元簇里所有HD(红色)、所有SP(紫色)和SP 606(紫色)的FlowSOM GITR暗示接在，标示出直方由此可知(c)和核心内容由此可知(d)。Wilcoxon配对小写字母秩和化验，p< 0.07(紫色)所有酪氨酸包括，p< 0.05(紫色)酪氨酸SP 606和也就是说的HD不包括在测试里。(e,f) HLA-DRhiGITR+Tregs里GITR暗示，从基准暂时性，从所有HD(红色)、所有SP(紫色)和SP 606(紫色)接在，标示出直方由此可知(e)和核心内容由此可知(f) *p< 0.05, Wilcoxon配对小写字母秩化验

由此可知4 来自减慢速重大突破的CD4+ treg细胞会压制畸变CD4+T细胞会的能力也减小。SP小组用紫色的中央线和带子指不止，HD小组用黄色的中央线和带子指不止，紫色的中央线/带子指不止酪氨酸sp606。可用CD4+CD25+ Treg分选试剂盒对CD4+T细胞会展开分选。CD4+CD25−(应将答者)被标示不止为CFSE, Treg按观察的数量溶液。用抗CD3 /28微珠重置细胞会，人才3天后展开流式细胞会绝技样品。(a-d)与CD4+应将答者相对于应将的treg人才(继发性)(e-h) HD、SP或SP 606 Treg与HD应将答者人才。(a,b,f) CFSE诱导(a,e)和CFSE抑止倍数(b,f)。(c, d,h) CD25 (c,g)和CD134 (d,h)的抑止倍数。可用HIV对照(触发的鼓动细胞会不含treg)算不止抑止倍数。*p< 0.05， **p< 0.01， ***p< 0.001，重复测量双向方差分析。†p < 0.0 5 Bonferroni的事后多重比较测试

由此可知5 畸变CD4+T细胞会对减慢速重大突破的T细胞会重置的抑止更敏感性。SP小组用紫色的中央线和带子指不止，HD小组用黄色的中央线和带子指不止，紫色的中央线/带子指不止酪氨酸sp606。可用CD4+CD25+Treg分选试剂盒对CD4+T细胞会展开分选。CD4+CD25−(应将答者)被cfsel标示不止，treg按观察的数量溶液。用抗CD3 /28微珠重置细胞会，人才3天后展开流式细胞会绝技(CD25反染)和细胞会因子分析。HD Treg与HD、SP或sp606应将答者共同人才。(a,b) CFSE诱导(a)和CFSE抑止花红(b)。(c,d) CD25抑止花红(c)和CD134抑止花红(d)。(e,f) IFN-γ(e)和IL-17A (f)在共人才里的暗示。***p< 0.001， **p< 0.01，重复测量双向方差分析。†p < 0.0 5 Bonferroni的事后多重比较测试

论点：我们得不止的论点是，来自减慢速重大突破子的重置梦境CD4+Treg在GITR暗示里取得了扩展和丰富，突显了进一步统计分析Treg在1同型癌症风险有机棒状里的异质性的必要性。

原文不止处：

Boldison J, Long AE, Aitken RJ,et al.Activated but functionally impaired memory Tregs are expanded in slow progressors to type 1 diabetes.Diabetologia 2021 Oct 28